Bawang tiwai (Eleutherine palmifolia L. Merr) merupakan jenis tanaman yang memiliki kandungan alkaloid, glikosida, flavonoid, fenolik dan tanin. Kandungan dari tanaman ini dapat digunakan sebagai antioksidan dan secara empiris dapat digunakan untuk mengobati kanker payudara, hipertensi, diabetes melitus dan menurunkan kolesterol. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antioksidan dari umbi bawang tiwai. Pengujian antioksidan dilakukan dengan menggunakan metode 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil (DPPH). Umbi bawang tiwai di maserasi dengan menggunakan etanol 70%. Uji pendahuluan kandungan dan antioksidan dilakukan dengan menggunakan kromatografi lapis tipis dengan menggunakan fase gerak klorofom : metanol. Pereaksi semprot yang digunakan yaitu sitroborat dan DPPH 200 ppm. Hasil uji dengan KLT menunjukan sampel mengandung senyawa flavonoid setelah disemprot sitroborat pada uv 366nm. Pada pelat KLT yang dilihat secara sinar tampak menunjukan positif mengandung senyawa antioksidan yang ditandai dengan timbulnya warna kuning dengan latar belakang ungu setelah disemprot dengan DPPH 200 ppm yaitu pada hRf 86,6. Hasil pengukuran secara spektofotometri uv-vis menunjukan ekstrak memiliki aktivitas antioksidan dengan IC50 533,974 ppm.