Kopi instan memiliki kandungan kafein lebih rendah daripada kopi bubuk dan mengandung tambahan gula. Konsumsi kopi instan dengan kadar gula yang tinggi memiliki dampak peningkatan kadar glukosa darah dan dapat merusak organ pankreas apabila berlangsung secara terus menerus. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kadar glukosa darah tikus jantan sebelum dan sesudah pemberian kopi instan tinggi gula dosis bertingkat, mengetahui perbedaan gambaran histologi sel β pankreas setelah pemberian kopi instan tinggi gula serta mengetahui hubungan antara pemberian kopi instan tinggi gula dengan gambaran histologi sel β pankreas tikus wistar. Jenis penelitian ini menggunakan true experimental dengan rancangan pre test and post test with control group design yang dilakukan di Laboratorium Terpadu departemen Zoologi pada bulan April-Juli 2020. Sampel pada penelitian ini sebanyak 24 ekor tikus jantan wistar. Data diperoleh dari hasil pemeriksaan glukosa darah dan pengamatan preparat histologi pankreas, dianalisis menggunakan uji one way ANOVA dilanjut dengan General Llinear Model untuk pemeriksaan glukosa darah, pengamatan preparat histologi pankreas dianalisis dengan uji one way ANOVA. Hasil penelitian menunjukkan tidak terdapat pengaruh antara kadar glukosa darah sebelum dan setelah pemberian kopi instan tinggi gula dosis bertingkat p=0,096 (p >0,05), terdapat perbedaan gambaran histologi sel β pankreas tikus wistar setelah pemberian kopi instan tinggi gula dosis bertingkat yang ditandai dengan adanya degenerasi dan terdapat pengaruh antara pemberian kopi instan tinggi gula dengan kerusakan sel β pankreas p=0,000 (p<0,05).