Lada perdu (Piper nigrum L) merupakan komoditas ekspor yang menjadi salah satu sumber devisa negara. Produktivitas lada perdu di Indonesia masih rendah, hal ini dipengaruhi oleh beberapa faktor di antaranya adalah teknik budidaya dan ketersediaan bibit yang kurang baik. Oleh karena itu, perlu upaya penyediaan bibit yang baik, di antaranya dengan menggunakan zat pengatur tumbuh Rootone-F yang tepat dan di kompinasikan dengan media tanam yang baik. Tujuan penelitian adalah mengetahui konsentrasi pemberian Rootone-F dan jenis media tanam serta interaksinya terhadap keberhasilan stek lada perdu (Piper nigrum L). Penelitian mengunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan dua faktor. Faktor pertama yaitu konsentrasi Rootone-F terdiri dari 4 taraf yaitu A0 (konsentrasi 0 mg/ml air), A1 (konsentrasi 100 mg/ml air), A2 (konsentrasi 200 mg/ml air), A3 (konsentrasi 300 mg/ml air). Faktor kedua berupa jenis media tanam yaitu B0 (tanah), B1 (pasir), B2 (abu sekam), B3 (arang sekam). Masing-masing perlakuan diulang sebanyak 3 kali. Parameter yang diamati meliputi saat tumbuh tunas, jumlah tunas, jumlah daun, saat tumbuh akar, jumlah akar, panjang akar dan presentase stek hidup. Analisis statistik menggunakan uji F dan dilanjutkan dengan uji Duncan Multipe Range Test (DMRT) pada taraf kepercayaan 95%. Hasil penelitian menunjukan bahwa konsentrasi Rootone-F, media tanam dan kombinasi keduanya berpengaruh nyata terhadap parameter jumlah tunas, jumlah akar dan panjang akar, namun tidak berpengaruh nyata terhadap saat tumbuh tunas, jumlah daun, saat tumbuh akar dan persentase stek hidup.