Latar belakang: Etil palmitat sebagai produk metabolisme alkohol dapat terdeteksi dalam sampel rambut dan mencerminkan pola konsumsi dalam jangka panjang. Penelitian ini memvalidasi metode kromatografi gas-spektrometri massa (GC-MS) untuk mendeteksi etil palmitat dalam rambut dengan parameter linearitas, LOD, LOQ, akurasi, presisi, dan selektivitas. Metode: Validasi metode menggunakan Gas Chromathography Mass Spektroscopy (GC-MS) dengan ekstraksi menggunakan NH2 cartridges SPE (100 mg/1 mL). Hasil: Hasil validasi metode yang didapat yaitu nilai koefisien korelasi (r) sebesar 0,9361. LOD sebesar 40,734388 ppm dan LOQ sebesar 135,78129 ppm. %RSD sebesar 0,064904%. %Recovery yang diperoleh dari pengujian sebesar 0,077573232%. Pada uji selektivitas tidak terdapat puncak pada sampel sebelum penambahan standar, dan puncak analit muncul setelah penambahan standar pada waktu retensi yang konsisten dengan standar murni. Kesimpulan: Hasil validasi metode analisis etil palmitat dalam sampel rambut tidak memenuhi parameter uji linearitas, LOD, LOQ, dan akurasi. Hasil uji selektivitas menunjukkan puncak analit muncul setelah penambahan standar. Hasil pengujian sampel dengan metode adisi standar diperoleh konsentrasi etil palmitat yang terdeteksi dalam sampel rambut sebesar 3,1701 ng/mg, dengan jumlah total analit dalam 30 mg rambut sebesar 95,103 ng.