Jenis penelitian yang digunakan dalam penelitian ini adalah penelitian kuantitatif yang bertujuan untuk mengetahui pengaruh budaya organisasi, lingkungan kerja dan stres kerja. Subjek dalam penelitian ini adalah karyawan Rumah Sakit Islam Banjarnegara. Sampel yang digunakan dalam penelitian adalah sebanyak 150 responden. Analisis yang digunakan adalah analisis regresi linear berganda. Hasil analisis data secara parsial variabel budaya organisasi berpengaruh positif signifikan terhadap kinerja karyawan, variabel lingkungan kerja berpengaruh positif signifikan terhadap kinerja karyawan dan variabel stres kerja tidak berpengaruh signifikan terhadap kinerja karyawan.