Indonesia merupakan negara produsen kopi terbesar ketiga di dunia tetapi memiliki produktivitas perkebunan kopi yang rendah (FAO, 2015). Salah satu faktor yang diduga menjadi penyebab rendahnya produktivitas kopi di Indonesia adalah rendahnya ketersediaan bibit unggul (Priyono, 2010). Salah satu alternatif yang dapat digunakan untuk menyediakan bibit kopi yang berkualitas adalah melalui teknik embriogenesis somatik. Namun demikian, bibit yang dihasilkan dengan menggunakan teknik tersebut tergolong mahal sebagai akibat relatif lama waktu yang dibutuhkan untuk kultur in vitro. Alternatif yang dapat dilakukan untuk mempersingkat waktu kultur in vitro adalah melalui aklimatisasi embrio somatik secara langsung (direct sowing) ke dalam kondisi ex vitro. Sampai saat ini tingkat keberhasilan direct sowing untuk kopi robusta tergolong rendah, oleh karena itu penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh substrat tanam terhadap keberhasilan aklimatisasi embrio somatik kopi secara langsung. Embrio somatik fase kotiledon ditanam pada substrat tanam arang sekam yang dikombinasikan dengan cocopeat ataupun serbuk kopi dengan perbandingan 1 : 1 ataupun 1 : 2 (v/v). Setiap perlakuan disiram dengan medium dasar MS (Murashige-Skoog, 1962) tanpa penambahan gula dan vitamin serta ditambahkan ZPT furfuryl amino purin (kinetin) 10-7 dan indole butyric acid (IBA) 10-5. Hasil penelitian menunjukkan bahwa embrio somatik yang ditanam pada substrat arang sekam : cocopeat (1:1, v/v) memiliki tingkat keberhasilan yang tinggi (83 %) serta memiliki tinggi rata-rata 4 mm dan jumlah daun sebanyak 2 helai terbaik setelah 12 minggu kultur. Penambahan cocopeat dengan kombinasi yang lebih tinggi (1:2) justru menurunkan tingkat keberhasilan aklimatisasi. Demikian pula dengan substrat tanam arang sekam saja ataupun kombinasi arang sekam dengan serbuk kopi tidak berhasil digunakan untuk aklimatisasi embrio somatik kopi secara langsung.