Latar Belakang: Antibiotik salah satu pengobatan utama yang digunakan dalam tatalaksana penyakit infeksi dengan penyebab utama yaitu bakteri. Saat ini penggunaan antibiotik tergolong cukup tinggi, menurut data who tahun 2021 terkait penggunaan antibiotik secara global mengalami kenaikan sebesar 91% dalam beberapa waktu belakangan ini. Data (antibiotic resistance) di Indonesia secara khusus pada tahun 2022 sebesar 68% kemudian pada tahun 2024 sebesar 70,75% angka tersebut menunjukan adanya peningkatan resistensi antibiotik. Selain penggunaan antibiotik yang tidak rasional faktor lainnya yang mendukung terjadinya resistensi antibiotik yaitu kurangnya pemahaman dan kesadaran masyarakat. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui hubungan antara tingkat pengetahuan remaja terhadap rasionalitas penggunaan antibiotik yang dapat dijadikan sebagai upaya pencegahan resistensi antibiotik dikalangan siswa – siswi SMA di Kecamatan Banjarharjo. Metode: Penelitian ini merupakan penelitian deskriptif analitik dengan rancangan cross sectional. Kuesioner dibuat dengan menggunakan skala guttman dan menggunakan skala likert. Adapun teknik pengambilan sampel menggunakan purposive sampling. Hasil: Sebanyak 200 responden terlibat dalam penelitian ini didapatkan hasil tingkat pengetahuan antibiotik dan resistensi menujukkan 161 responden berpengetahuan baik (80,1%), 36 responden (18,0%) berpengetahuan cukup, dan 3 responden (3%) berpengetahuan kurang. Untuk rasionalitas penggunaan antibiotik 136 responden (68%) temasuk dalam kategori positif dan 64 responden (32%) termasuk dalam kategori negatif. Kesimpulan: Terdapat hubungan antara tingkat pengetahuan antibiotik terhadap perilaku penggunaan antibiotik rasional pada Siswa – siswi Sekolah Menengah Atas se-Kecamatan Banjarharjo dengan hasil P value 0,000≤0,005.