Latar Belakang: Jeruju (Acanthus ilicifolius, L.) mengandung senyawa 2-benzoxazolinone, α-amyrin dan acanthaminoside yang diduga memiliki aktivitas peredaman radikal bebas. Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis aktivitas peredaman radikal bebas sediaan gel daun Jeruju secara in vitro dan in silico. Metode: Pengujian in vitro dilakukan dengan metode DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil). Formulasi sediaan gel dibuat dalam 3 variasi konsentrasi ekstrak yaitu (5,25%), (10,5%), dan (21%) dengan bahan tambahan HPMC 2%, propilen glycol 15%, propil paraben 0,025%, metil paraben 0,075% dan aquadest. Pengujian in silico dilakukan dengan molecular docking senyawa 2-benzoxazolinone, α-amyrin dan acanthaminoside terhadap target enzim sitokrom P450 (CYP450) (PDB ID:1OG5). Hasil: uji in vitro menunjukan bahwa ekstrak etanol daun Jeruju memiliki aktivitas peredaman radikal bebas sedang dengan nilai IC50 104,8 ppm. Senyawa asam askorbat yang bertindak sebagai kontrol positif menunjukkan aktivitas sangat kuat (IC50 15,7 ppm). Senyawa 2-benzoxazolinone yang ditemukan terkandung pada fraksi etil asetat dari ekstrak etanol daun Jeruju ternyata tidak menunjukan aktivitas. Sediaan gel FI (5,25%) memiliki sifat fisik yang memenuhi kriteria sediaan gel yang baik dengan aktivitas tertinggi (IC50 196,9 ppm). Hasil uji molecular docking menunjukan adanya interaksi antara senyawa-senyawa kandungan Jeruju yaitu 2-benzoxazolinone (-5,9 kkal/mol), α-amyrin (-11,3 kkal/mol) dan acanthaminoside (-7,7 kkal/mol) dengan CYP450, dengan α-amyrin menunjukkan ikatan yang paling kuat dibandingkan dengan asam askorbat (-5,1 kkal/mol) ataupun warfarin (-9,9 kkal/mol). Kesimpulan: Sediaan gel ekstrak etanol daun Jeruju FI memiliki aktivitas peredaman radikal bebas dengan sifat fisik yang memenuhi kriteria. Kandungan α-amyrin dalam daun Jeruju diprediksi dapat menghambat CYP450