Demam tifoid merupakan manifestasi dari infeksi bakteri Salmonella sp., jalur infeksinya melalui kontaminasi makanan dan minuman kemudian masuk ke dalam tubuh manusia melalui mulut. Respon tubuh yang terinfeksi secara otomatis akan membentuk antibodi akibat paparan antigen yang disajikan oleh bakteri Salmonella sp. Identifikasi demam tifoid melalui uji widal, menggunakan sampel serum dan plasma yang direaksikan dengan reagen khusus pemeriksaan widal. Hasil pemeriksaan berupa aglutinasi pada saat kedua bahan dicampurkan pada takaran tertentu. Tujuan penelitian mengetahui perbandingan hasil pemeriksaan widal menggunakan sampel serum dan plasma. Penelitian ini menggunakan rancangan cross sectional. Penelitian didapatkan titer widal pada sampel serum terbanyak 1/320 dari 8 responden (61,5%) sedangkan pada plasma EDTA terbanyak 1/160 dari 6 responden (46,2%) dengan p value = 0,131 (p ≥ 0,05). Berdasarkan nilai tersebut dapat dinyatakan bahwa tidak terdapat perbedaan hasil pemeriksaan widal menggunakan sampel serum dan plasma EDTA metode slide pada responden di Desa Pesanggrahan Kecamatan Kesugihan Kabupaten Cilacap.